微生物質(zhì)譜鑒定微生物的基本流程
更新時(shí)間:2022-06-23 點(diǎn)擊次數(shù):2765
微生物質(zhì)譜一般由進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、質(zhì)量分析器、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等部分組成。由于進(jìn)樣方式、離子源、質(zhì)量分析器等的不同,質(zhì)譜儀分為不同的種類,臨床上常見的有液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS-MS)、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS-MS)、電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOFMS)等等。
微生物質(zhì)譜質(zhì)譜分析是一種通過(guò)測(cè)量離子質(zhì)荷比(質(zhì)量-電荷比),從而確定其質(zhì)量的分析方法,通俗點(diǎn)講,質(zhì)譜就是一種類型的“秤”,只不過(guò)它稱量的是離子的質(zhì)量,在眾多的分析測(cè)試方法中被認(rèn)為是一種同時(shí)具備高特異性和高靈敏度且得到了廣泛應(yīng)用的普適性方法。
用一定強(qiáng)度的激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜,基質(zhì)從激光中吸收能量,與樣品之間發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移使得樣品分子電離。離子在高壓電場(chǎng)作用下加速進(jìn)入飛行管中,小離子飛得快,先到達(dá)探測(cè)器,大離子飛得慢,后到達(dá)探測(cè)器,從而得出測(cè)定結(jié)果。
鑒定微生物基本流程是,將微生物純培養(yǎng)后,點(diǎn)靶加釋放液,微生物經(jīng)過(guò)釋放液充分處理后,可使得細(xì)胞內(nèi)的蛋白成分更好地釋放出來(lái),待溶劑揮發(fā)后加基質(zhì),蛋白分子與基質(zhì)形成基質(zhì)結(jié)晶,上質(zhì)譜檢測(cè)。
在質(zhì)譜儀中,樣品通過(guò)有效的電離將不同質(zhì)荷比(m/z)的離子分開形成微生物特異性的清晰的指紋圖譜,通過(guò)分析關(guān)鍵的質(zhì)譜峰數(shù)據(jù),與數(shù)據(jù)庫(kù)中的已知菌種譜圖進(jìn)行比對(duì),即可快速得到微生物鑒定結(jié)果。